Hoechst 33258, blau fluoreszierender Nukleinsäurefarbstoff
| Artikel-Nr. | Packungseinheit | Preis | Vorlaufzeit | Jetzt kaufen |
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| 2F010 | 5 mL, 10 mg/mL in Water | $85 | Auf Lager | |
| 1I010 | 100 mg | $115 | Auf Lager |
Hoechst 33258 (Bisbenzimid, HOE 33258) ist ein zellpermeabler, blau leuchtender fluoreszierender Farbstoff, der stark an adenin-thyminreiche Bereiche in der kleinen Furche der doppelsträngigen DNA bindet. Obwohl Hoechst 33258 an alle Nukleinsäuren binden kann, erhöhen AT-reiche dsDNA-Stränge seine Fluoreszenz erheblich.
Hoechst 33258, gebunden mit DNA, hat Anregungs-/Emissionsmaxima von 351/463 nm. Die Fluoreszenzintensität von Hoechst 33258 nimmt mit dem pH-Wert des Lösungsmittels zu. Der ungebundene Farbstoff fluoresziert im Bereich von 510–540 nm. Die grüne Fluoreszenz des ungebundenen Farbstoffs kann beobachtet werden, wenn eine übermäßige Farbstoffkonzentration verwendet wird oder die Probe unzureichend ausgewaschen ist. Der Farbstoff weist einen beträchtlichen Stokes-Shift zwischen dem Anregungs- und Emissionsspektrum auf, was ihn für Mehrfarbenmarkierungsexperimente lohnenswert macht.
Hoechst 33258 kann in lebende Zellen eindringen, seine Zellpermeabilität ist jedoch zehnmal geringer als die von Hoechst 33342. Wie alle Farbstoffe der Hoechst-Familie ist Hoechst 33258 weniger toxisch als DAPI, was eine höhere Lebensfähigkeit der gefärbten Zellen gewährleistet.
Hoechst 33258 wird umfangreich in der Fluoreszenzmikroskopie und Durchflusszytometrie zur Färbung von Chromosomen und Zellkernen in lebenden und fixierten Zellen verwendet. Der Farbstoff wird oft verwendet, um kondensierte, pycnotische Kerne in apoptotischen Zellen und bei der Zellsortierung zu unterscheiden.
Hoechst 33258 wird durch Bromdesoxyuridin (BrdU) gehemmt, das häufig zur Erkennung von teilenden Zellen verwendet wird. Wenn BrdU in die DNA integriert wird, soll das Bromin die kleine Furche deformieren, sodass Hoechst-Farbstoffe nicht ihren optimalen Bindungsort erreichen können. Diese Eigenschaft von Hoechst 33258 wird verwendet, um den Zellzyklus zu untersuchen.
Die übliche Farbstoffkonzentration zur Färbung von Bakterien- oder Eukaryoten-Zellen beträgt 0,1–10 μg/ml.
Absorptions- und Emissionsspektren von Hoechst 33258 (DNA-Farbstoff-Komplex)
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| Erscheinungsform: | dunkelgelber Feststoff |
| Molekülmasse: | 533.89 |
| Molekülformel: | C25H27Cl3N6O |
| Löslichkeit: | Wasser, DMSO, DMF |
| Qualitätskontrolle: | NMR 1H und HPLC-MS (≥95 %) |
| Lagerungsbedingungen: | 24 Monate ab dem Wareneingang bei −20 °C an einem lichtgeschützten Ort. Transport: bei Raumtemperatur bis zu drei Wochen. Trocken lagern. |
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| Product specifications |
Spektrale Eigenschaften
| Anregungs-/Absorptionsmaximum / nm: | 351 (complex) |
| Emissionsmaximum / nm: | 463 (complex) |
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