DAPI, blau fluoreszierender Nukleinsäurefarbstoff

Zellkerne Zelllebensfähigkeit und Apoptose Mikroskopie Durchflusszytometrie
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DAPI (4′,6-Diamidino-2-Phenylindol) ist ein blau fluoreszierender Farbstoff, der stark an Adenin-Thymin-reiche Regionen in der DNA bindet. Es wird weit in der Fluoreszenzmikroskopie, Durchflusszytometrie und Chromosomenfärbung als Kerngegenfärbung verwendet. DAPI wird häufig eingesetzt, um fixierte Zellen zu färben, da der Farbstoff membranundurchlässig ist, obwohl der Farbstoff in lebende Zellen eindringen kann, wenn er in hohen Konzentrationen verwendet wird.

Bei Bindung an doppelsträngige DNA zeigt DAPI eine etwa 20-fache Verstärkung der Fluoreszenz mit einem Absorptionsmaximum bei 355 nm und einem Emissionsmaximum bei 460 nm. DAPI bindet auch an RNA, obwohl er in dem Fall nicht so stark fluoresziert. Wenn er an RNA gebunden ist, verschiebt sich sein Emissionsspektrum auf etwa 500 nm.

Es gibt eine leichte Fluoreszenzüberlappung zwischen DAPI und grün fluoreszierenden Molekülen wie Fluorescein und GFP. Eine spektrale Entmischung wird empfohlen, wenn eine äußerst präzise Bildanalyse erforderlich ist. DAPI ist vielfach empfindlicher als Ethidiumbromid für die Färbung von DNA in Agarosegelen. Es kann zum Photofootprinting von DNA und zum Nachweis von angelagerten Sonden in Blotting-Anwendungen eingesetzt werden, indem der doppelsträngige Komplex spezifisch sichtbar gemacht wird. Außerdem ist die DAPI-Färbung eine sensitive und spezifische Nachweismethode für Mykoplasmen.

Die Arbeitskonzentration des DAPI zur Fürbung eukaryotischen Zellen ist üblicherweise 1 μg/ml. Dennoch muss die beste Farbstoffkonzentration experimentell ermittelt werden, weil diese vom Zelltyp und der Zelldichte abhängt.

DAPI, blau fluoreszierender Nukleinsäurefarbstoff, 2996-10mg
DAPI, blau fluoreszierender Nukleinsäurefarbstoff, 2996-10mg
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Produkt in Aktion

Menschliche periphere Blutneutrophile, gefärbt mit LumiTrace DiD (3251-x) lipophilen Tracer und DAPI (2996-x) Nukleinfarbstoff

Menschlicher Blutabstrich gefärbt mit dem blau fluoreszierenden Kernfärbemittel DAPI und Antikörpern gegen die neutrophile Myeloperoxidase

Absorptions- und Emissionsspektren von DAPI

Absorptions- und Emissionsspektren von DAPI

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Ein Fluoreszenzfarbstoff zum Nachweis von DNA und RNA in Gelen, eine hervorragende und ungefährliche Alternative zu Ethidiumbromid.

Allgemeine Eigenschaften

Erscheinungsform: gelber Feststoff bzw. Lösung
Molekülmasse: 350.25
CAS-Nummer: 28718-90-3
Molekülformel: C16H17Cl2N5
Löslichkeit: gut löslich in DMF, DMSO
Qualitätskontrolle: NMR 1H und HPLC-MS (≥95 %)
Lagerungsbedingungen: 24 Monate ab dem Wareneingang bei −20 °C an einem lichtgeschützten Ort. Transport: bei Raumtemperatur bis zu drei Wochen. Trocken lagern.
Sicherheitsdatenblatt: herunterladen
Product specifications

Spektrale Eigenschaften

Anregungs-/Absorptionsmaximum / nm: 355
ε / L⋅mol−1⋅cm−1: 28800
Emissionsmaximum / nm: 460

Zitierungen

  1. Samatoshenkov, I.V.; Aimaletdinov, A.M.; Zakirova, E.Y.; Chelyshev, Y.A.; Samatoshenkova, J.M.; Kadyrov, M.S.; Kniazev, E.A.; Salakhov, B.I.; Mukhamedshina, Y.O. The Combined Delivery of the Vegf, Ang, and Gdnf Genes Stimulates Angiogenesis and Improves Post-Ischemic Innervation and Regeneration in Skeletal Muscle. Current Issues in Molecular Biology, 2024, 46(8), 8611-8626. doi: 10.3390/cimb46080507
  2. Potapenko, E.Y..; Kashko, N.D.; Knorre, D.A. Spontaneous Mutations in Saccharomyces cerevisiae mtDNA Increase Cell-to-Cell Variation in mtDNA Amount. International Journal of Molecular Sciences, 2023, 24(24), 17413. doi: 10.3390/ijms242417413
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