AF430 ist ein mit Alexa Fluor™ 430 identischer Cumarinfarbstoff mit einem Absorptionsmaximum bei 430 nm und Emission im grün-gelben Bereich (Emissionsmaximum bei 542 nm). Er ist einer der wenigen Fluorophore, der im Bereich zwischen UV-Licht anregbaren Farbstoffen (beispielsweise DAPI mit einem Anregungsmaximum bei 358 nm, Alexa Fluor 350 bei 346 nm, AMCA/AMCA-X bei 350 nm) und Fluorescein (Anregungsmaximum bei 494 nm) absorbiert. AF430 ist sehr photostabil und hydrophil: Er trägt eine Trifluormethylgruppe, die Photobleichung reduziert, während seine Sulfogruppen für eine bessere Wasserlöslichkeit und eine höhere Quantenausbeute in wässrigen Lösungen sorgen. Der Fluorophor kann mit dem violetten 405 nm Laser angeregt werden, dabei ist seine Fluoreszenz im Bereich von pH 4 — 10 pH-unabhängig.

Aufgrund seiner großen Stokes-Verschiebung (112 nm) ist AF430 eine gute Wahl für die Multiplex-Fluoreszenz-Anwendungen wie Weitfeldmikroskopie, Konfokal-Mikroskopie, STED-Mikroskopie und Durchflusszytometrie. Der Einsatz von Fluorophoren mit einer großen Stokes-Verschiebung reduziert die Anzahl der Anregungs-/Detektionskanäle und lässt eine Überlappung der Fluoreszenzspektren der gemeinsam verwendeten Farbstoffe vermeiden.

AF430 zeichnet sich durch eine hohe Photostabilität aus und eignet sich daher hervorragend für die STED-Mikroskopie, bei der man mit dem Anregungslicht einer extrem hohen Intensität arbeitet. Bei der STED-Mikroskopie verwendet man den Farbstoff AF430 mit einer großen Stokes-Verschiebung in Kombination mit einem Farbstoff, der eine kleine Stokes-Verschiebung aufweist. Dabei werden beide Fluorophore mit einer Wellenlänge abgeregt (die Fluoreszenz von AF430 kann mit dem 660 nm Laser unterdrückt werden).

Dank seiner ausgezeichneten spektralen Eigenschaften wird AF430 häufig in FRET-Experimenten sowohl in Lebenswissenschaften als auch in Materialwissenschaften eingesetzt.