Hoechst 34580, blau fluoreszierender Nukleinsäurefarbstoff

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Hoechst 34580 (Bisbenzimid, HOE 34580) ist ein zellpermeabler, blau leuchtender fluoreszierender Farbstoff, der stark an adenin-thyminreiche Bereiche in der kleinen Furche der doppelsträngigen DNA bindet. Obwohl Hoechst 34580 an alle Nukleinsäuren binden kann, erhöhen AT-reiche dsDNA-Stränge seine Fluoreszenz erheblich.

Hoechst 34580, gebunden mit DNA, hat Anregungs-/Emissionsmaxima von 380/438 nm. Die Fluoreszenzintensität von Hoechst 34580 nimmt mit dem pH-Wert des Lösungsmittels zu. Der ungebundene Farbstoff fluoresziert im Bereich von 510–540 nm. Die grüne Fluoreszenz des ungebundenen Farbstoffs kann beobachtet werden, wenn eine übermäßige Farbstoffkonzentration verwendet wird oder die Probe unzureichend ausgewaschen ist. Der Farbstoff weist einen beträchtlichen Stokes-Shift zwischen dem Anregungs- und Emissionsspektrum auf, was ihn für Mehrfarbenmarkierungsexperimente lohnenswert macht.

Hoechst 34580 wird umfangreich in der Fluoreszenzmikroskopie und Durchflusszytometrie zur Färbung von Chromosomen und Zellkernen in lebenden und fixierten Zellen verwendet. Der Farbstoff wird oft verwendet, um kondensierte, pycnotische Kerne in apoptotischen Zellen und bei der Zellsortierung zu unterscheiden.

Hoechst 34580 wird durch Bromdesoxyuridin (BrdU) gehemmt, das häufig zur Erkennung von teilenden Zellen verwendet wird. Wenn BrdU in die DNA integriert wird, soll das Bromin die kleine Furche deformieren, sodass Hoechst-Farbstoffe nicht ihren optimalen Bindungsort erreichen können. Diese Eigenschaft von Hoechst 34580 wird verwendet, um den Zellzyklus zu untersuchen.

Die übliche Farbstoffkonzentration zur Färbung von Bakterien- oder Eukaryoten-Zellen beträgt 0,1–10 μg/ml.

Absorptions- und Emissionsspektren von Hoechst 34580 (DNA-Farbstoff-Komplex)

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Allgemeine Eigenschaften

Erscheinungsform: braunes Pulver
Molekülmasse: 560.96
CAS-Nummer: 911004-45-0
Molekülformel: C27H32Cl3N7
IUPAC-Name: N,N-Dimethyl-4-[5-(4-methyl-1-piperazinyl)[2,5′-bi-1H-benzimidazol]-2′-yl]benzenamine trihydrochloride
Löslichkeit: Wasser, DMSO, DMF
Qualitätskontrolle: NMR 1H und HPLC-MS (≥95 %)
Lagerungsbedingungen: 24 Monate ab dem Wareneingang bei −20 °C an einem lichtgeschützten Ort. Transport: bei Raumtemperatur bis zu drei Wochen. Trocken lagern.
Sicherheitsdatenblatt: herunterladen
Product specifications

Spektrale Eigenschaften

Anregungs-/Absorptionsmaximum / nm: 380 (complex)
Emissionsmaximum / nm: 438 (complex)
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