Hoechst 33342, blau fluoreszierender Nukleinsäurefarbstoff
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| 2G010 | 5 mL, 10 mg/mL in Water | $85 | Auf Lager | |
| 1H010 | 100 mg | $125 | Auf Lager |
Hoechst 33342 (Bisbenzimid, HOE 33342) ist ein zellpermeabler, blau leuchtender fluoreszierender Farbstoff, der stark an adenin-thyminreiche Bereiche in der kleinen Furche der doppelsträngigen DNA bindet. Obwohl Hoechst 33342 an alle Nukleinsäuren binden kann, erhöhen AT-reiche dsDNA-Stränge seine Fluoreszenz erheblich.
Hoechst 33342, gebunden mit DNA, hat Anregungs-/Emissionsmaxima von 351/461 nm. Die Fluoreszenzintensität von Hoechst 33342 nimmt mit dem pH-Wert des Lösungsmittels zu. Der ungebundene Farbstoff fluoresziert im Bereich von 510–540 nm. Die grüne Fluoreszenz des ungebundenen Farbstoffs kann beobachtet werden, wenn eine übermäßige Farbstoffkonzentration verwendet wird oder die Probe unzureichend ausgewaschen ist. Der Farbstoff weist einen beträchtlichen Stokes-Shift zwischen dem Anregungs- und Emissionsspektrum auf, was ihn für Mehrfarbenmarkierungsexperimente lohnenswert macht.
Die zusätzliche Ethylgruppe in Hoechst 33342 macht ihn zellpermeabler als DAPI und andere Hoechst-Farbstoffe. Hoechst 33342 zeigt eine 10-mal höhere Zellpermeabilität als Hoechst 33258. Hoechst 33342 ist auch weniger toxisch als DAPI, was eine höhere Vitalität der gefärbten Zellen gewährleistet.
Hoechst 33342 wird umfangreich in der Fluoreszenzmikroskopie und Durchflusszytometrie zur Färbung von Chromosomen und Zellkernen in lebenden und fixierten Zellen verwendet. Der Farbstoff wird oft verwendet, um kondensierte, pycnotische Kerne in apoptotischen Zellen und bei der Zellsortierung zu unterscheiden.
Hoechst 33342 wird durch Bromdesoxyuridin (BrdU) gehemmt, das häufig zur Erkennung von teilenden Zellen verwendet wird. Wenn BrdU in die DNA integriert wird, soll das Bromin die kleine Furche deformieren, sodass Hoechst-Farbstoffe nicht ihren optimalen Bindungsort erreichen können. Diese Eigenschaft von Hoechst 33342 wird verwendet, um den Zellzyklus zu untersuchen.
Die übliche Farbstoffkonzentration zur Färbung von Bakterien- oder Eukaryoten-Zellen beträgt 0,1–10 μg/ml.
Absorptions- und Emissionsspektren von Hoechst 33342 (DNA-Farbstoff-Komplex)
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| Erscheinungsform: | orangefarbener Feststoff, gelbe Lösung |
| Molekülmasse: | 561.95 |
| CAS-Nummer: | 23491-52-3 |
| Molekülformel: | C27H31Cl3N6O |
| IUPAC-Name: | 2′-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5′-bi-1H-benzimidazole trihydrochloride |
| Löslichkeit: | Wasser, DMSO, DMF |
| Qualitätskontrolle: | NMR 1H und HPLC-MS (≥95 %) |
| Lagerungsbedingungen: | 24 Monate ab dem Wareneingang bei −20 °C an einem lichtgeschützten Ort. Transport: bei Raumtemperatur bis zu drei Wochen. Trocken lagern. |
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| Product specifications |
Spektrale Eigenschaften
| Anregungs-/Absorptionsmaximum / nm: | 351 (complex) |
| Emissionsmaximum / nm: | 461 (complex) |
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