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Sulfo-Cyanin-5-PEG3-Biotin

Sulfo-Cyanin 5 ist ein breit eingesetzter fernrot emittierender Fluoreszenzfarbstoff für die Markierung von Biomolekülen. Die Absorptions- und Emissionsmaxima von Sulfo-Cyanin 5 liegen bei 646 nm und 662 nm. Fernrote Fluorophore, die bei mehr als 650 nm fluoreszieren, eignen sich gut für verschiedene Imaging-Verfahren, die eine niedrige Hintergrundfluoreszenz erfordern. Sie werden außerdem in Multiplex-Anwendungen zusammen mit NIR-, orange, grün und blau emittierenden Farbstoffen verwendet.

Biotin, oder wasserlösliches Vitamin H, spielt eine zentrale Rolle im zellulären Stoffwechsel. Es bindet hochaffin und nicht-kooperativ an Avidin (ein Glykoprotein aus Hühnerei) und Streptavidin (ein aus Bakterien isoliertes Avidinanalogon) sowie Neutravidin (deglykosylierte Form des Avidins). Das Konjugat des Fluorophors Sulfo-Cyanin 5 mit Biotin eignet sich deshalb für Nachweis und Quantifizierung von Bindestellen an Avidin in verschiedenen biologischen Proben.

Das Reagenz ist gut wasserlöslich, seine Fluoreszenz ist im Bereich von pH 4 bis pH 10 pH-unabhängig. Ein flexibler PEG3-Linker zwischen Biotin und Cyanin 5 lässt sterische Hinderung bei Bindung des Konjugats an Avidin vermeiden.

Sulfo-Cyanin-5-Biotin kann in verschiedenen Imaging-Anwendungen (beispielsweise Markierung primärer und sekundärer Antikörper in Western-Blot, Immunanalysen, Zyto- und Immunhistochemie, Durchflusszytometrie), Messung der Bindungsaffinität und Dissoziationskonstanten, Streptavidin-basierten Biosensoren u.v.m. eingesetzt werden.