Реакционная смесь PCR/qPCR
Смесь PCR/qPCR подходит как для проведения количественной ПЦР, так и для амплификации ДНК с последующей детекцией результатов методом электрофореза. Готовая 2-х кратная реакционная смесь содержит необходимые компоненты для проведения ПЦР, ее состав оптимизирован для получения идеальных результатов по процессивности и специфичности амплификации (содержит Hot-start полимеразу). В случае постановки реакции кПЦР, для детекции флуоресценции следует использовать ДНК-зонд, меченный флуорофором и тушителем (гидролизуемые зонды, "молекулярные маяки", праймеры типа "скорпион") или два зонда, меченных флуорофорами, образующими FRET-пару (вы можете заказать синтез зондов в Lumiprobe). Помимо ДНК-зондов, для детекции флуоресценции может использоваться интеркалирующий краситель dsGreen (dsGreen). Из-за отсутствия в составе UDG/dUTP смесь PCR/qPCR может использоваться для рутинных задач по клонированию и других задач, требующих дальнейшего использования продукта ПЦР после амплификации. Для постановки реакции смешайте в пробирке смесь PCR/qPCR, праймеры, ДНК, воду и зонд/краситель (в случае кПЦР). 1 мл реакционной смеси рассчитан на проведение 100 реакций объёмом 20 мкл.
Формат ПЦР: стандартная ПЦР (с последующим анализом методом гель-электрофореза), количественная ПЦР (ПЦР-РВ) с применением интеркалирующих красителей типа dsGreen или гидролизуемых зондов
Состав реакционной смеси: HS Taq ДНК-полимераза, смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов, ПЦР-буфер (содержит Mg2+)
Совместимость с оборудованием: совместим с амплификаторами любого типа
Возможные приложения: кПЦР, стандартная ПЦР, ОТ-ПЦР, генотипирование, ПЦР для проверки колоний, получение продукта для ТА-клонирования и др.
Ключевые характеристики смеси:
- Для постановки стандартной ПЦР (с последующим анализом методом гель-электрофореза) в смесь необходимо добавить только образец ДНК, праймеры и воду, что значительно экономит время на постановку реакции.
- Для постановки количественной ПЦР в смесь необходимо добавить интеркалирующий краситель или зонд для детекции продукта амплификации, образец ДНК, праймеры и воду.
- Подходит для ПЦР фрагментов длиной до 3 тыс. п.о., не более 70% GC, не требующих высокоточной амплификации.
- В качестве матрицы может использоваться геномная, вирусная, плазмидная ДНК и др.
- Формат готовой реакционной смеси снижает риск контаминации образцов.
- В состав реакционной смеси входит Taq-полимераза с технологией "горячего старта" (Hot Start). Используемая HS Taq ДНК-полимераза представляет собой комплекс моноклональных антител с ферментом. Прогрев образца в первом цикле ПЦР приводит к инактивации антител в составе комплекса и активирует фермент. Технология "горячего старта" позволяет предотвратить неспецифическую амплификацию и образование димеров праймеров.
- HS Taq ДНК-полимераза обладает 5'-3' полимеразной, 5'-3' экзонуклеазной активностью; также обладает трансферазной активностью: присоединяет дополнительный адениновый остаток к 3′ концам двуцепочечной ДНК, что позволяет использовать продукты ПЦР для ТА-клонирования.
Таблица подбора мастер микса для ПЦР
Реакционные смеси для количественной ПЦР (ПЦР-РВ) | ||||
---|---|---|---|---|
Название смеси | dsGreen | ROX | UDG, dUTP | Применение |
ProbeMaster ROX+UDG qPCR mix Cat.# •5214 | — | ✔ | ✔ | кПЦР с ДНК-зондами или интеркалирующим красителем |
ProbeMaster ROX qPCR mix Cat.# •5114 | — | ✔ | — | |
ProbeMaster dsGreen+ROX qPCR mix Cat.# •5514 | ✔ | ✔ | — | кПЦР с интеркалирующим красителем |
All-in-one qPCR master mix Cat.# •5414 | ✔ | ✔ | ✔ | |
All-in-one no ROX qPCR master mix Cat.# •5314 | ✔ | — | ✔ | |
Реакционная смесь для стандартной ПЦР | ||||
Basic PCR master mix Cat.# •5024 | — | — | — | ПЦР с последующим анализом методом гель-электрофореза, содержит краситель для нанесения на гель |
Универсальная реакционная смесь | ||||
PCR/qPCR master mix Cat.# •5534 | — | — | — | кПЦР с ДНК-зондами/интеркалирующим красителем или стандартная ПЦР с последующим анализом методом гель-электрофореза |
Empfohlenes Protokoll
Rechner
Kunden kauften zusammen mit diesem Produkt
LumiMount Fluoreszenz-Eindeckmedium
Ein wässriges Anti-Fade-Eindeckmedium zum Eindecken von Zellen und Geweben, die mit verschiedenen fluoreszierenden Farbstoffen gefärbt wurden.dsGreen für Echtzeit-PCR, 100×
Fluoreszierender Farbstoff zum Nachweis der Amplifikation in der Echtzeit-PCR in einer gebrauchsfertigen 100× Stammlösung zur Zugabe zum Mastermix.TCO-PEG4-NHS-Ester (axiales Isomer)
Ein heterobifunktioneller Linker mit trans-Cycloocten- und NHS-Estergruppen flankierend zu PEG4 (Tetraethylenglykol) zur Markierung von Antikörpern, Proteinen und anderen primären Amin-enthaltenden Biomolekülen.Общие свойства
Sicherheitsdatenblatt: | herunterladen |
Product specifications |