Sulfo-Cyanin5-Tyramid

Tyramide Sulfo-Cyanin5 Mikroskopie

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Die Tyramid-Signalverstärkung (TSA) ist der vielseitigste und effektivste Weg, um die Intensität des Fluoreszenzsignals zu verstärken, der in der Immunhistochemie (IHC, IHC), Immunzytochemie (ICC) und Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH) verwendet wird. Das TSA-Verfahren basiert auf der Fähigkeit von Meerrettichperoxidase (HRP) in Anwesenheit von geringen Konzentrationen an Wasserstoffperoxid, ein markiertes Tyramin enthaltendes Substrat in ein oxidiertes, hochreaktives freies Radikal umzuwandeln, das sich kovalent an die Tyrosinreste von lokalisierten Proteinmolekülen bindet Daneben.

Im Vergleich zu herkömmlichen Verfahren erhöht die TSA-Methode die Empfindlichkeit des Immunfluoreszenznachweises von Zielmolekülen um mehr als das 100-fache und eignet sich daher besonders zum Nachweis von Zielmolekülen mit niedriger Konzentration. Bei Anwendungen, bei denen keine erhöhte Nachweisempfindlichkeit erforderlich ist, erlaubt es TSA die Antikörper- oder Sondenkonzentrationen ohne Verlust der Signalintensität erheblich reduzieren und dadurch die Hintergrundfärbung aufgrund von Kreuzreaktivität oder unspezifischer Bindung von Antikörpern reduzieren.

Da die Bindung der Tyramid-Markierung kovalent ist, können Tyramide verschiedener Farbstoffe in mehreren aufeinanderfolgenden Runden der TSA-Färbung verwendet werden, um mehrere Ziele in derselben Probe nachzuweisen.

Dieses Tyramid ist ein Konjugat des wasserlöslichen dunkelroten Fluoreszenzfarbstoffs Sulfo-Cyanin5 (auch bekannt als Cy5^® und Cyanin5-Tyramide anderer Hersteller). Sulfo-Cyanin5-Tyramid ist Bestandteil vieler Kits zur Tyramid-Signalverstärkung (TSA). Es kann mit beliebigen Antikörpern oder anderen Molekülen (Streptavidin usw.), die an HRP konjugiert sind, verwendet werden, um Zellen und Gewebe durch Immunfluoreszenzverfahren zu färben.

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Absorptions- und Emissionsspektren von Sulfo-Cyanin5

Empfohlenes Protokoll

Tyramid-Signalverstärkung (TSA)

Rechner

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AF 488-Azid

Azidderivat des grün emittierenden Fluoreszenzfarbstoffs AF 488, das mit Alkinen in einer Alkin-Azid-Cycloaddition reagiert.

DMSO (Dimethylsulfoxid), Markierungsgüte

Reines Dimethylsulfoxid (DMSO), dessen Qualität auf Click- und andere Konjugationsreaktionen abgestimmt wurde.

BDP® 630/650-X-NHS-Ester

BDP 630/650 ist ein Bordipyrromethen-Fluorophor, der auf Cyanin-5-Filtersätze abgestimmt ist. Seine Fluoreszenz ist hell und sehr photostabil. Der Farbstoff eignet sich für Fluoreszenzpolarisationsmessungen. Bei diesem Derivat handelt es sich um einen aminreaktiven NHS-Ester.

Allgemeine Eigenschaften

Erscheinungsform:	dunkelblauer Feststoff
Molekülmasse:	800.05
Molekülformel:	C₄₀H₄₆KN₃O₈S₂
Löslichkeit:	löslich in Wasser, DMSO, DMF
Qualitätskontrolle:	NMR ¹H und HPLC-MS (≥95 %)
Lagerungsbedingungen:	24 Monate ab dem Wareneingang bei −20 °C an einem lichtgeschützten Ort. Transport: bei Raumtemperatur bis zu drei Wochen. Trocken lagern. Längere Lichteinwirkung vermeiden.
Sicherheitsdatenblatt:	herunterladen
	Product specifications

Spektrale Eigenschaften

Anregungs-/Absorptionsmaximum / nm:	646
ε / L⋅mol⁻¹⋅cm⁻¹:	271000
Emissionsmaximum / nm:	662
Fluoreszenz-Quantenausbeute:	0.28
CF₂₆₀:	0.04
CF₂₈₀:	0.04

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