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Annexin V-AF 647-Konjugat

Annexin V (oder Annexin A5) ist ein intrazellulares Protein aus der Familie der Phospholipid-bindenden Annexine. In der Durchflusszytometrie und Fluoreszenzmikroskopie wird Annexin V häufig verwendet, um apoptotische Zellen mithilfe seiner Fähigkeit spezifisch an Phosphatidylserin zu binden nachzuweisen. Die Anfangsphase der Apoptose wird von der Exposition des PS von der Innen- an der Außenseite der Plasmamembran begleitet.

Dieses Annexin V ist ein lyophilisiertes Konjugat mit AF 647, einem hellen, photostabilen fernroten Fluorophor mit Cyanin5-ähnlichen spektralen Eigenschaften (maximale Absorption ist bei 655 nm, maximale Emission liegt bei 680 nm). Fernrote Fluorophore, die bei mehr als 650 nm fluoreszieren, eignen sich gut für verschiedene Imaging-Verfahren, die eine niedrige Hintergrundfluoreszenz erfordern.

Die Färbung nur mit Annexin-V-AF 647 ist für die Unterscheidung zwischen apoptotischen und nekrotischen Zellen nicht genügend. Dazu emfiehlt sich eine zusätzliche Anfärbung mit Kernfarbstoffen (Propidiumiodid oder YODi-3), die lebende Zellen nicht durchdringen. Zu diesem Zweck könnte auch unser gebrauchsfertiges Annexin V-AF 647 Apoptose-Kit verwenden werden.

Lösen Sie das lyophilisierte Annexin-V-AF Konjugat in 50 μl (12515) oder in 250 μl (22515) deionisiertem Wasser.

Wichtig! Das aufgelöste Konjugat sollte vor Licht geschützt und bei 2–8 °C gelagert werden. In Lösung ist das Konjugat einen Monat lang stabil. Zur langfristigen Nutzung empfiehlt es sich, Aliquots herzustellen und bei −20 °C aufzubewahren, wobei Wiedereinfrieren vermieden werden sollte.