DAF-FM-Diacetat (4-Amino-5-methylamino-2',7'-difluorofluorescein-Diacetat)

Mikroskopie Durchflusszytometrie ROS-Erkennung
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DAF-FM-Diacetat (DAF-FM DA) ist ein zellpermeabler, fluoreszierender Sondenfarbstoff zur Detektion und Quantifizierung niedriger Konzentrationen von Stickstoffmonoxid (NO). DAF-FM DA diffundiert passiv durch Zellmembranen und wird, sobald es in den Zellen ist, von intrazellulären Esterasen deazetylisiert und in eine zellimpermeante Form — DAF-FM — umgewandelt.

Die Fluoreszenzquantenausbeute von DAF-FM beträgt etwa 0,005, steigt jedoch um etwa das 160-fache auf ca. 0,81 an, nachdem es mit NO reagiert und ein fluoreszierendes Benzotriazol mit den Exzitations-/Emissionsmaxima von 495/515 nm bildet.

Die NO-Nachweisgrenze von DAF-FM (~3 nM) ist empfindlicher als die von DAF-2 (~5 nM). Die Fluoreszenz des NO-Addukts von DAF-FM ist unabhängig vom pH-Wert über pH 5,5. Zudem zeigt das NO-Addukt von DAF-FM eine signifikant verbesserte Photostabilität im Vergleich zu DAF-2 , was zuverlässige Ergebnisse und zusätzliche Zeit für die Bildgebung gewährleistet.

DAF-FM DA sollte in DMSO gelöst und anschließend zur Vorbereitung einer Arbeitslösung verwendet werden. Pufferlösungen, die Rinderserumalbumin (BSA) oder Phenolrot enthalten, können die Fluoreszenz beeinflussen und sollten vorsichtig verwendet werden.

DAF-FM-Diacetat (4-Amino-5-methylamino-2',7'-difluorofluoresceindiacetat), 1A100
DAF-FM-Diacetat (4-Amino-5-methylamino-2',7'-difluorofluoresceindiacetat), 1A100
DAF-FM-Diacetat (4-Amino-5-methylamino-2',7'-difluorofluoresceindiacetat), 1A100
Struktur von DAF-FM-Diacetat
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Allgemeine Eigenschaften

Erscheinungsform: beigefarbene Feststoff
Molekülmasse: 496.42
CAS-Nummer: 254109-22-3
Molekülformel: C25H18F2N2O7
Löslichkeit: DMSO
Qualitätskontrolle: NMR 1H und HPLC-MS (≥95 %)
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