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LumiTracker® Lyso Red

Der Fluoreszenzfarbstoff LumiTracker Lyso Red reichert sich selektiv in den Zellenorganellen mit einem niedrigen pH-Wert. Er wird unter anderem zur selektiven Anfärbung von Lysosomen in lebenden Zellen eingesetzt, die den niedrigen pH-Wert, das heißt das saure Milieu, mit Hilfe der Protonenpumpe für eine effektive Arbeit hydrolytischer Enzyme aufrechterhalten.

Dieser Farbstoff eignet sich für die Vitalfärbung der Zellen und ist auch ohne Zusatz von Detergenzien frei membrangängig. LumiTracker Lyso Red besitzt ein BDP-Grundgerüst und zeigt stark ausgeprägte hydrophobe Eigenschaften, was ihm eine gute Membrangängigkeit verleiht. Der Farbstoff trägt außerdem eine Aminogruppe, die als schwache Base agiert. Diese ist im neutralen Milieu nicht vollständig protoniert, so dass das Farbstoffmolekül relativ neutral bleibt und besser die Zellmembran durchdringt. Vermutlich wird der Farbstoff nach Eindringen in Lysosomen mit dem sauren Medium protoniert und so in den Organellen mit einem niedrigen pH-Wert zurückgehalten.

Da der Farbstoff sehr schnell in die Zellen eindringt und die Protonierung des Farbstoffs für die lokale Alkalisierung sorgt, wird empfohlen, die lebenden Zellen unmittelbar vor Visualisierung nicht länger als 7 Minuten zu färben. Eine Fixierung der Zellen nach der Färbung ist auch möglich, das verstärkt allerdings unspezifische Hintergrundsignale. Trotz der hohen Selektivität des Farbstoffs gegenüber von Lysosomen, eignet er sich nicht zu deren Zählung und soll nur zu Visualisierungszwecken verwendet werden.

Die Absorptions- und Fluoreszenzmaxima von LumiTracker Lyso Red liegen bei 577 nm bzw. 590 nm. Für Visualisierung von Lysosomen bieten wir auch LumiTracker Lyso Green für grüne Filtersätze mit dem Absorptions- und Fluoreszenzmaximum bei 504 nm bzw. 511 nm.

Die Konzentration der gelieferten Lösung beträgt 1 mM in DMSO.

Anwendungsempfehlungen:

Arbeitskonzentration: 50-75 nM.*

Färbung: 3-7 Minuten bei 37 °C in 1× PBS (unmittelbar vor der Visualisierung, als separater Schritt bei einer Mehrfachfärbung).

*je nach Zelllinie könnten eine höhere Konzentration und/oder längere Färbezeit erforderlich sein.

LysoTracker™ ist eine Marke von Molecular Probes Inc.