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Lipophilic Tracer Sampler Kit

Lipophile Carbocyanin-Farbstoffe sind cyanine Fluoreszenzfarbstoffe mit hydrophoben Kohlenwasserstoffketten. Diese Farbstoffe zeigen in wässriger Umgebung eine geringe Fluoreszenz, jedoch eine hohe Fluoreszenz, wenn sie in Lipid-Doppelschichten integriert sind, was sie wertvoll für die Membranfärbung macht. Sie markieren effektiv und dauerhaft zytoplasmatische Membranen und verschiedene intrazelluläre Membranstrukturen in einer Vielzahl von Zelltypen ^[1]. Diese Farbstoffe wurden als Tracer in Untersuchungen zu Zellfusion ^[2], Zelladhäsion ^[3] und Migration ^[4] eingesetzt, da sie eine geringe Toxizität und eine starke Resistenz gegen den Transfer zwischen Zellen aufweisen. Durch die Verwendung verschiedener Fluoreszenzfarben können Zellpopulationen eindeutig markiert und nach dem Mischen identifiziert werden. Eine Doppelmarkierung kann helfen, Zellen zu identifizieren, die fusioniert oder Cluster gebildet haben ^[5]. Darüber hinaus werden diese Farbstoffe häufig als anterograde und retrograde axonale Tracer in lebenden ^[1,6] und fixierten ^[7,8] neuronalen Geweben und Zellen verwendet.

Dieses Kit enthält Proben von acht Carbocyanin-Farbstoffen mit unterschiedlichen Membrandiffusionsraten, Löslichkeit und Fluoreszenzeigenschaften:

• DiI (DiIC18(3); 1,1’-dioctadecyl-3,3,3’,3’-tetramethylindocarbocyanin) ist ein heller und photostabiler orange-roter fluoreszierender lipophiler Farbstoff, der häufig für die Membranfärbung, Zellverfolgung, axonale Tracing und Super-Resolution-Bildgebung mittels STORM verwendet wird ^[9].
• DiO (DiOC18(3); 3,3’-dioctadecyloxacarbocyanin) ist ein weit verbreiteter grüner fluoreszierender lipophiler Farbstoff mit einer langsameren lateralen Diffusionsrate auf den Membranen als DiI. DiO wird oft zusammen mit DiI in Dual-Color-Studien verwendet.
• DiA (4-Di-16-ASP; 4-(4-(dihexadecylamino)styryl)-N-methylpyridiniumjodid) ist ein gelb-grüner fluoreszierender lipophiler Farbstoff, der sich viel schneller als DiO in Zellmembranen diffundiert. DiA wird oft zusammen mit DiI für die Dual-Color-Markierung verwendet.
• DiD (DiIC18(5); 1,1’-dioctadecyl-3,3,3’,3’-tetramethylindodicarbocyanin) ist ein Analogon von DiI mit rotverschobenen Fluoreszenzanregungs- und Emissionsspektren, die es ermöglichen, Autofluoreszenz und phototoxische Effekte während der Bildgebung zu vermeiden. Der Farbstoff wird für Multicolor-Markierungen und Super-Resolution-Bildgebung mittels STORM verwendet ^[9].
• DiR (DiIC18(7); 1,1’-dioctadecyl-3,3,3’,3’-tetramethylindotricarbocyanin) ist ein nahinfraroter (NIR) fluoreszierender lipophiler Farbstoff. Der NIR-Bereich des Spektrums ist für viele Gewebe optisch transparent, sodass DiR für die In-vivo-Bildgebung bei kleinen Tieren ^[10] und für die Super-Resolution-Mikroskopie mittels STORM verwendet werden kann ^[9].
• Neuro-DiO ist ein grün fluoreszierender lipophiler Carbocyanin-Farbstoff. Im Gegensatz zu DiO wurde Neuro-DiO speziell entwickelt, um die Löslichkeit in Membranen zu verbessern und die Bildung nichtfluoreszierender Aggregate zu verhindern, die die Diffusionsrate des Farbstoffs verringern könnten.
• RAPID DiI (dilinoleyl DiI; FAST DiI™; 1,1’-dilinoleyl-3,3,3’,3’-tetramethylindocarbocyanin) ist ein ungesättigtes Analogon von DiI mit schnellerer lateraler Diffusionsrate in Zellmembranen als das ursprüngliche DiI. Es ist besonders nützlich für das Tracing von Neuronen sowohl in lebendem als auch in fixiertem Gewebe.
• RAPID DiO (dilinoleyl DiO; FAST DiO™; 1,1’-dilinoleyl-3,3’-oxacarbocyanin) ist ein ungesättigtes Analogon von DiO mit schnellerer lateraler Diffusionsrate in Zellmembranen als das ursprüngliche DiO. Es ist besonders nützlich für das Tracing von Neuronen sowohl in lebendem als auch in fixiertem Gewebe.

Referenzen:

^[1] J Cell Biol 103, 171 (1986); ^[2] Cytometry 21, 160 (1995); ^[3] J Cell Biol 136, 1109 (1997); ^[4] Anticancer Res 18, 4181 (1998); ^[5] J Immunol Methods 156, 179 (1992); ^[6] Trends Neurosci 12, 333 (1989); ^[7] Methods Cell Biol 38, 325 (1993); ^[8] Development 101, 697 (1987); ^[9] Proc Natl Acad Sci U S A 109, 13978 (2012); ^[10] Curr Drug Deliv 13, 40 (2016).